مقایسه روش های P‏CR-RFLP ، مستقیم میکروسکوپی و کشتNNN در تشخیص لیشمانیوز جلدی

چکیده زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L5.8Sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد. مواد و روش‌کار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL،60 بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN وPCR–RFLP تهیه گردید. لام‌های رنگ‌آمیزی شده با لنز روغنی×100 جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN ، انتقال داده شد. پس از استخراجDNA با استفاده از روش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS1 با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم HaeIII ایزوله‌ها درمقایسه با سویه‌های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS15 مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافته‌ها: روش میکروسکوپی در 36 مورد از 60 بیمار (%60) و نتایج کشت نمونه ها در محیط NNN در 37 مورد (%62) مثبت شد. در روش PCR-RFLP 55 مورد (%91)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.